adrb2_human

NAME

4LDO

ORGANISM

Human (Homo sapiens)

PROTEIN NAME

adrb2_human

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
G
Q
P
G
N
G
S
A
F
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
L
L
A
P
N
G
S
H
A
P
20
 
 
 
 
 
 
 
 
    
          TM1    
D
H
D
V
T
Q
E
R
D
E
30
                   
                   
V
W
V
V
G
M
G
I
V
M
40
                   
                   
S
L
I
V
L
A
I
V
F
G
50
                   
                   
N
V
L
V
I
T
A
I
A
K
60
                   
  ICL1 TM2    
F
E
R
L
Q
T
V
T
N
Y
70
                   
                   
F
I
T
S
L
A
C
A
D
L
80
                   
                   
V
M
G
L
A
V
V
P
F
G
90
         
 
  
 
    
                   
A
A
H
I
L
M
K
M
W
T
100
                   
ECL1 TM3      
F
G
N
F
W
C
E
F
W
T
110
                   
                   
S
I
D
V
L
C
V
T
A
S
120
                   
                   
I
E
T
L
C
V
I
A
V
D
130
                   
                   
R
Y
F
A
I
T
S
P
F
K
140
                   
ICL2   TM4    
Y
Q
S
L
L
T
K
N
K
A
150
                   
                   
R
V
I
I
L
M
V
W
I
V
160
                   
                   
S
G
L
T
S
F
L
P
I
Q
170
                   
    ECL2        
M
H
W
Y
R
A
T
H
Q
E
180
           
 
      
                   
A
I
N
C
Y
A
N
E
T
C
190
                   
          TM5    
C
D
F
F
T
N
Q
A
Y
A
200
                   
                   
I
A
S
S
I
V
S
F
Y
V
210
                   
                   
P
L
V
I
M
V
F
V
Y
S
220
                   
                   
R
V
F
Q
E
A
K
R
Q
L
230
         
 
 
 
 
 
                   
Q
K
I
D
K
S
E
G
R
F
240
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ICL3            
H
V
Q
N
L
S
Q
V
E
Q
250
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
D
G
R
T
G
H
G
L
R
R
260
 
 
 
  
 
          
  TM6            
S
S
K
F
C
L
K
E
H
K
270
                   
                   
A
L
K
T
L
G
I
I
M
G
280
                   
                   
T
F
T
L
C
W
L
P
F
F
290
                   
                   
I
V
N
I
V
H
V
I
Q
D
300
                   
ECL3 TM7      
N
L
I
R
K
E
V
Y
I
L
310
                   
                   
L
N
W
I
G
Y
V
N
S
G
320
                   
                H8
F
N
P
L
I
Y
C
R
S
P
330
                   
                   
D
F
R
I
A
F
Q
E
L
L
340
               
 
 
  C-term      
C
L
R
R
S
S
L
K
A
Y
350
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
N
G
Y
S
S
N
G
N
T
360
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
E
Q
S
G
Y
H
V
E
Q
370
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
E
K
E
N
K
L
L
C
E
D
380
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
L
P
G
T
E
D
F
V
G
H
390
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
Q
G
T
V
P
S
D
N
I
D
400
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
Q
G
R
N
C
S
T
N
D
410
 
 
 
     
S
L
L
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG            
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TEV proteas
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lysozyme
 
                  
  TM1            
 
D
E
V
W
V
V
G
M
G
37
                   
                   
I
V
M
S
L
I
V
L
A
I
47
                   
                   
V
F
G
N
V
L
V
I
T
A
57
                   
        ICL1    
I
A
K
F
E
R
L
Q
T
V
67
                   
TM2              
T
N
Y
F
I
T
S
L
A
C
77
                   
                   
A
D
L
V
M
G
L
A
V
V
87
               
 
  
                   
P
F
G
A
A
H
I
L
T
K
97
 
                  
ECL1 TM3      
T
W
T
F
G
N
F
W
C
E
107
                   
                   
F
W
T
S
I
D
V
L
C
V
117
                   
                   
T
A
S
I
E
T
L
C
V
I
127
                   
                   
A
V
D
R
Y
F
A
I
T
S
137
                   
ICL2            
P
F
K
Y
Q
S
L
L
T
K
147
                   
TM4              
N
K
A
R
V
I
I
L
M
V
157
                   
                   
W
I
V
S
G
L
T
S
F
L
167
                   
          ECL2  
P
I
Q
M
H
W
Y
R
A
T
177
                 
 
                   
H
Q
E
A
I
N
C
Y
A
E
187
                   
                   
E
T
C
C
D
F
F
T
N
Q
197
                   
TM5              
A
Y
A
I
A
S
S
I
V
S
207
                   
                   
F
Y
V
P
L
V
I
M
V
F
217
                   
                   
V
Y
S
R
V
F
Q
E
A
K
227
               
 
  
                   
R
Q
L
Q
K
I
D
K
 
F
264
 
                  
TM6              
A
L
K
E
H
K
A
L
K
T
274
                   
                   
L
G
I
I
M
G
T
F
T
L
284
                   
                   
C
W
L
P
F
F
I
V
N
I
294
                   
          ECL3  
V
H
V
I
Q
D
N
L
I
R
304
                   
TM7              
K
E
V
Y
I
L
L
N
W
I
314
                   
                   
G
Y
V
N
S
G
F
N
P
L
324
                   
        H8        
I
Y
C
R
S
P
D
F
R
I
334
                   
                   
A
F
Q
E
L
L
C
L
R
R
344
       
 
C-term
S
S
L
K
 

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term
 
 
 
TM1
 
ICL1
 
 
 
TM2
 
 
ECL1
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
 
 
ECL2
 
 
TM5
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ICL3
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C-term

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TEV pr
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lys
 
 
 
 TM1
 
ICL1
 
 
 
TM2
 
 
ECL1
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
 
 
ECL2
 
 
TM5 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8
 
 
C-term 


DIAGRAMS

ICL1 E R L Q ICL1ECL1 M W T F ECL1ICL2 P F K Y Q S L L ICL2ECL2 W Y R A T H Q E A I N C Y A N E T C C D F F T ECL2ICL3 G R F H V Q N L S Q V E Q D G R T G H G L R R S ICL3ECL3 D N L I ECL3N-term M G Q P G N G S A F L L A P N G S H A P D H D V T N-termC-term L R R S S L K A Y G N G Y S S N G N T G E Q S G Y H V E Q E K E N K L L C E D L P G T E D F V G H Q G T V P S D N I D S Q G R N C S T N D S L L C-term Q E R D E V W V V G M G I V M S L I V L A I V F G N V L V I T A I A K F T V T N Y F I T S L A C A D L V M G L A V V P F G A A H I L M K G N F W C E F W T S I D V L C V T A S I E T L C V I A V D R Y F A I T S T K N K A R V I I L M V W I V S G L T S F L P I Q M H N Q A Y A I A S S I V S F Y V P L V I M V F V Y S R V F Q E A K R Q L Q K I D K S E S K F C L K E H K A L K T L G I I M G T F T L C W L P F F I V N I V H V I Q R K E V Y I L L N W I G Y V N S G F N P L I Y C R S P D F Q E F R I A L L C

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated
96 |  M T
98 |  M T
187 |  N E
265 |  C A

DELETIONS

  • from 1 to 28
  • from 236 to 263
  • from 349 to 413

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: tag

    Name: FLAG
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_0 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: prot_cleavage

    Name: TEV protease
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_1 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: fusion

    Name: T4 Lysozyme (T4L)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_2 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Sf9 Insect BestBac

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DDM 1.0 %(w/v)

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    Alkylation by Iodoacetamide None
    Detergent DDM exchanged with 0.01% LMNG None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: in meso/LCP
    TYPE: lipidic cubic phase (LCP) (7.7 MAG)
    PROTEIN CONCENTRATION: NA NA
    Temperature: 20°C
    ph : 6.5-6.5

    Remarks: Crystals were grown using 30 nl protein/lipiddrops with 600 nl overlay solution which conisted of the crystal precipitants

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Additional
    unknown MES pH 6.2 to pH 6.7 100 mM
    unknown Ammonium phosphate dibasic 40-100 mM
    unknown PEG400 18-24 %(v/v)
    Detergent
    detergent LMNG 0.01 % w/v
    Lipid
    lipid CHS 0.001 %w/v